生物製品是製藥工業的一部分，對生產廠房有很高的潔淨要求。曾在市售的嗜酸乳杆菌產品中，分離到人為汙染的短乳杆菌、發酵乳杆菌和植物乳杆菌等。生物製品生產中，尤其是活菌、活疫苗的生產中，經常受到不同程度的汙染，因此，不僅需要重視潔淨室的建立，更要重視質量控製方法及標準。

朝鮮戰爭中，美國發現大量電子儀器失靈，最後找到了主要原因，是灰塵在作怪，促成了潔淨技術的起步。1961年，誕生了世界上最早的潔淨室標準，既美國空軍技術條令203，1963年，頒布了國際上最著名的潔淨室標準：美國聯邦FS209。1966年，頒布了修訂後209A， 時至1992年，建立了迄今被廣泛采用的209E。國際上為了加強藥品、生物製品質量管理規範 (GMP)，把潔淨室定為必備的生產硬件之一。GMP對廠房、設備等，明確規定了相應的潔淨要求，並製訂了有關標準。

1　潔淨室的汙染源

潔淨室汙染源按性質可分物理、化學、生物等。直徑在0.001-1000μm的固態、液態或二者 的混合物質，包括生物粒子和非生物粒子，91短视频版在线观看WWW稱為懸浮粒子(airborne particles)。微生物一般以無生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠(Aerosol)形式存在於空氣中，1μm以下者永外懸浮，10μm以上者會逐漸沉下來而形成菌塵。潔淨室汙染可分為外部汙染和內部汙染。外部汙染指大氣塵汙染，可以通過光電法測得。內部汙染，是由人和有關的物品、設備等引起的。人是潔淨室最大的汙染源，占90%左右。人和環境造成了潔淨室的汙染，所以在潔淨室中，人的數量和活動應有特別嚴格的限製。一般男性每人每分鍾向周圍排放1000個以上的含菌粒子，女性為750個以上。穿衣服時，靜止態發菌量為10-300個/min•人，行走時的發菌量為900-2500個/min人。咳嗽一次發菌量為70-700個/min•人，噴嚏一次為400-600個/min人。廣州91短视频在线下载免费工程公司

2　潔淨室質控標準

潔淨室是指空氣潔淨度達到規定級別要求的可供人類工作的場所，其功能是控製微粒的汙染 。一般按用途可分為：1.工業潔淨室，以無生命的微粒為控製對象;2.生物潔淨室，主要 控製微生物對工作對象的汙染。

美國是世界上最早頒布潔淨室標準的國家，各國的潔淨室標準都是在美國標準的基礎上，結合各國的實際情況而製訂的，我國的標準基本上參照美國聯邦標準和歐共體的標準而製訂的。

3　潔淨室質控的檢測方法及討論

3.1　塵埃粒子　由於空氣中存在大量塵埃粒子，而微生物大多依附於這些塵埃粒子隨空氣流動造成汙染。製藥工業用多種方法獲得無菌狀態，過濾法以其捕集率高，又經濟而被廣泛使用。其中，特別應該提到的是采用了HEPA(High Eqqicienoy Particulate Air)過濾器，對0.3μm以上空氣 粒子捕集率高達99.97%以上，除濾過病毒外，空氣中所有微生物顆粒可被濾除。因此，正常潔淨室是無菌的，但是，由於人、物、環境等汙染因素，潔淨室往往受到不同程度汙染。因此，91短视频版在线观看WWW多采用激光塵埃粒子計數且進行監控。

3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子。應用細菌采樣器抽取一定量的空氣 使其滯留在培養基上，經過培養計數菌落數。早在現代微生物問世之前，人們就認為某些疾 病是由被稱為“瘴氣”的空氣汙染而引起。20世紀30年代，英國研製porton液體采樣器，美 國研製了AGI液體采樣器。1941年，Bourdion使用裂縫式采樣器，成為空氣微生物采樣測定 的開端。1956年，報道了第一個篩孔撞擊式采樣器，1958年A.A.Andersn對其加以改進並 定型生產，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器。它由頂罩、6節篩板、3個彈簧及抽氣孔和動力裝置構成。目前，這種采樣器已發展到8級，並有許多改進型。由於它采集粒譜廣、效率高、生物失活率低等原因而廣泛使用至今。空氣微生物采樣器一般分為七大類：液體 式、固體式、沉降式、離心式、光散射式和大容量式。本文將對離心式空氣微生物采樣器(RCS)作詳細討論。

3.3　表麵微生物　為了檢測潔淨室中牆壁、地板、儀器表麵、桌麵、門把等帶菌情況，通常選用接觸壓印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法。需要時，還可與過濾裝置相結合來完成棉拭采樣。1941年，Walter和Hvcker報道了contact瓊脂平板方法，以後，Angelotti和Fotert等作了進一步的工作。帶菌狀況都有要求，歐共體GMP( 最新草案)規定，100級：平均菌落數不可超過5 個;1000級：25個;100000級：50個。表麵微生物的檢測，越來越受到人們的重視。

3.4　關於沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock創立。依靠空氣中的粒子自然沉降於瓊脂平板上的這種采集方法，由於粒子沉降的速率很慢，如需采集到有效數量的粒子，就需暴露很長時間。但因空氣中的致病菌數量是很少的，金黃色菌菌球菌在醫院病房空氣中平均每140升才有一個活菌粒子，為了彌補這個 缺陷，曾采用直徑為14公分的大平皿，以增加瓊脂的暴露麵積。Harding和Williams還曾用 一種多層平板的方法來進一步暴露麵積，每層放一個14公分直徑的平板，但結果不堪滿意。

奧姆梁斯基曾試圖把采樣後平板上長出的菌落換算成一定體積空氣中的微生物含量，以便能 利用沉降平板法的采樣結果來測定空氣中的活菌濃度。為此，他設定了在100cm2營養瓊脂上暴露5分鍾後，培養長出的菌落，即相當於10升空氣中的活菌數。由於懸浮在空氣中的含 菌粒子直徑不超過100μm，這些小粒子在空氣中的沉降受空氣阻力的影響，其沉降速率遵循國際上的Stokes公式。根據這個公式，粒子的沉降速率與其大小成正比，但是，奧姆梁斯基恰好忽略了這一點，因此，它是不能成立的。例如，直徑1μm的含菌粒子，在5分鍾內沉降 距離為1.05cm，大部分的粒子就沉降不到瓊脂表麵上。

由於潔淨室已濾除了大部分大顆粒，一般用此法是無意義的。但是，人為、環境和潔淨裝置 故障等原因引起的較大顆粒汙染以及沉降平板采樣潔的簡便，可作為日常監測潔淨室水平的 一種參考方法。廣州91短视频在线下载免费工程公司

3.5　關於RCS　離心式空氣采樣器(The Reuter Centrifugal Sampler,RCS)被介紹作為一種在醫院使用的檢測空氣微生物的儀器，由於它輕便，無噪音而廣泛使用，並擴展到製藥工業等領域。RCS通過離心收集顆粒，為製藥工業所接受，因為它似乎符合FDA所描述的“Active”采樣儀器。Gre-schel等認為它相當有效，Macher等則持反對意見。多年來，許多研究者研究了帶菌 顆粒的大小，結論是：5-15μm，中等粒是13μm，而4μm以下很少。這些結果是從醫院、手術室、辦公室、實驗室和製藥無菌室所獲得。他們認為，如果顆粒大小是已知的，RCS可定 量測定細菌濃度，但是，目前這些顆粒大小是未知的，故不能把它視為定量采樣器，隻能歸於沉降平皿一樣的類型。Delmore等發現，100級無菌室中，RCS/slit比率是2.1，即RCS是slit采樣器微生物捕促率的210%有效。我國丁璽華等也仿製了RCS，選用國產元件，試製了LWC-1型離心式空氣采樣器。